常用试剂配方-strippingbuffer

🎓配方一（50℃水浴，适用于NC和PVDF膜）： β-mercaptoethanol 342 μl 20% SDS 5 ml 1M Tris-Cl pH 6.7 3.125 ml 加ddH2O至50 ml 使用方法：将用过的膜浸入stripping buffer中，置50℃水浴箱中30min，间歇性震荡，然后用TBS洗5min/次，直到没有味道就行，然后封闭，就可以重新孵一抗了。 🎓配方二（常温，适用于PVDF膜）： 5M NaOH 使用方法： 将用过的膜先用TBST或PBST洗10min。加入stripping buffer常温洗10min。 用TBST或PBST洗3次，每次10min。 重新封闭后孵一抗。 🎓配方三（常温，温和型，适用于NC膜和PVDF膜）： 15g glycine 1g SDS 10ml Tween20 调节pH至 2.2 加ddH2O定容至1L 使用方法：加入stripping buffer常温洗10min，弃去加入stripping buffer，加入新的stripping buffer常温洗10min，PBS洗2次，每次10min，再用TBST或PBST洗2次，每次10min，重新封闭后孵一抗。 🎓配方四（常温，适用于NC和PVDF膜）： 100 mM glycine 200 mM NaCl 0.1% Tween 20 0.1% β-mercaptoethanol 调节pH至 2.5 使用方法：加入stripping buffer常温洗45min。PBS洗2次，每次10min。再用TBST或PBST洗2次，每次10min。重新封闭后孵一抗。 我使用的是配方二和三，优点是常温，适用于NC和PVDF膜。配方二比较激烈，配方三比较温和，一张膜可以反复剥离和敷抗体两三次没问题。剥离效果还可以，stripping buffer可以重复使用3次以上都没问题。配方二剥离蛋白后会使膜比较黑，但是不影响曝光，显影仪下颜色正常，一般只剥离一次，第二次效果就不太好了。 分享给大家。[喝奶茶R] 之前还出过很多别的常用试剂配方，大家可以去翻看自行保存